百邁客推出的Biomarker?One Step SYBR Green RT-qPCR Kit（目錄號：RK02012），實現(xiàn)在同一個管中，一步完成從反轉(zhuǎn)錄到定量PCR的全部反應(yīng)。該試劑盒以RNA為模板，并配合優(yōu)化的緩沖體系，避免了非特異性擴增，保證實驗結(jié)果重復(fù)性好，可信度高。
產(chǎn)品性能
1.操作簡單：一次加樣，可完成cDNA合成和定量PCR實驗，同時避免了樣本交叉污染。
2.靈敏度較高：緩沖體系中添加了提高擴增能力的促進因子，可檢測低至10 pg的總RNA。
3.特異性較強：預(yù)混液中添加了有效抑制非特異性擴增的組分，可抑制引物二聚體的產(chǎn)生，定量更精準(zhǔn)。
4.卓越的擴增性能:良好的線性關(guān)系，擴增效率高達99%，且重復(fù)性高。
5.適用所有機型：試劑盒中有獨立包裝的的ROX?I和ROX?II、可用于校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。
部分實驗數(shù)據(jù)
以下RNA模板，均是用百邁客微量動物組織RNA提取試劑盒提取
1.靈敏度檢測：均以小鼠肝臟RNA為模板，設(shè)置不同的濃度梯度：10μg、1μg、100ng、10ng、1ng、100pg、10pg，然后進行定量分析。發(fā)現(xiàn)該試劑盒擴增效率可達99.1%，10 pg的RNA模板也完全可以擴增。
圖1：以10 μg-10 pg小鼠肝臟總?RNA為模板，擴增?GAPDH基因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：線性范圍可達7個數(shù)量級，靈敏度可達?10 pg測分析。
2.重復(fù)性檢測：分別設(shè)置30個復(fù)孔，擴增相同的基因，發(fā)現(xiàn)擴增曲線的Ct值幾乎一致。
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圖2：以100 ng小鼠肝臟總?RNA為模板，設(shè)置30個復(fù)孔，擴增β-actin基因，擴增重復(fù)率高。
3.物種多樣性檢測：分別以多種動、植物的RNA為模板，進行定量分析。發(fā)現(xiàn)所有的樣本對應(yīng)的目的完全片段，均成功擴增出來。
圖3：物種多樣性檢測：分別以不同物種、不同濃度的RNA為模板，進行一步法RT-qPCR擴增。包括人肝癌（藍(lán)色）；果蠅（綠色）；小鼠腸道（黑色）；番茄果（紅色）；日本水稻（紫色）；辣椒（橙色）；石斑魚（灰色）。
相關(guān)產(chǎn)品
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